NIBSC93/722白介素10試劑盒的使用方法

　　NIBSC93/722白介素10是由160個氨基酸組成4個α螺旋結構的的細胞因子，分子量為18.5 kDa。在水溶液中以二聚體形式存在，分子量約為39 kDa。是個多效性的因子，能夠對多種細胞起作用，主要表現為免疫抑制和免疫刺激兩方面的作用，特別是在調節淋巴系和髓系的細胞功能方面扮演重要的作用。IL-10 也具有單核細胞/巨噬細胞依賴、抗原刺激引起的的PBMNC 和 NK 細胞合成其它細胞因子的抑制作用。巨噬細胞膜介導的共刺激引起的T細胞和NK細胞活化后的產物及功能也可被IL-10所抑制。

 

　　IL-10是單核細胞/巨噬細胞功能的強有力的調節物。IL-10作為細胞介導的免疫反應的抑制物，能夠抑制像前列腺素E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等許多引起炎癥的細胞因子。IL-10 能夠促進可溶性TNF受體的釋放和ICAM－1和B7在細胞表面的表達。IL-10還參與B細胞、柱狀細胞及胸腺細胞的增殖和分化的調控。

 

　　NIBSC93/722白介素10劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中IL-10 的濃度。IL-10 捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標本或參考品時，其中的IL-10 會與捕獲抗體結合，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當加入生物素化的抗人IL-10 抗體后，抗人IL-10 抗體與IL-10 接合，形成夾心的免疫復合物，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標記的親合素。

 

　　生物素與親合素特異性結合，親合素連接的酶就會與夾心的免疫復合物連接起來；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。加入顯色劑，若樣本中存在IL-10 將會形成免疫復合物，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入中止液后呈黃色。通過酶標儀檢測，讀其450nm處的OD值，IL-10 濃度與OD450值之間呈正比，通過參考品繪制標準曲線，對照未知樣本中OD值，即可算出標本中IL-10 濃度。